DEPARTAMENTO DE CIENCIA ANIMAL Instituto de ... - RiuNet - UPV

that our current cryopreservation technologies for boar sperm do not yield sufficient or reliable fertility ...... Jiang ZL, Li QW, Hu JH, Li WY, Zhao HW, Zhang SS.
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DEPARTAMENTO DE CIENCIA ANIMAL Instituto de Ciencia y Tecnología Animal

Treating boar sperm with cholesterol-loaded cyclodextrins or cyclodextrins prior to cryopreservation: Effects on post-thaw in vitro sperm quality of sperm cryopreserved in different freezing extenders

(Efecto del tratamiento de los espermatozoides de verraco con ciclodextrinas saturadas de colesterol sobre la calidad del semen crioconservado con distintos crioprotectores)

Doctoral Thesis Eva Blanch Torres Valencia, October 2015

THESIS SUPERVISOR Dr. Eva Mocé Cervera Centro de Tecnología Animal Instituto Valenciano de Investigaciones Agrarias

This work was funded by Consellería de Agricultura, Medio Ambiente, Cambio Climático y Desarrollo Rural, through a postgraduate scholarship for conducting research projects and doctoral theses (DOGV nº 5324 the fourteenth of August of 2006), by CICYT AGL2006-07769/GAN co-financed by European Social Fund and GV/2007/163 from Generalitat Valenciana.

Solo si nos detenemos a pensar en las pequeñas cosas llegaremos a comprender las grandes José Saramago

Llegará un momento en que creas que todo ha terminado, ese será el principio Epicuro

ACKNOWLEDGEMENTS A mi directora de tesis, la Dra. Eva Mocé, por toda la dedicación, la orientación y por todo lo aprendido a lo largo de estos años. A mi “compi” Cristina Tomás, porque después de ella no ha habido compi que la supere, por todos los buenos ratos que hemos pasado juntas, por todas las comidas a contrarreloj (maldito timer) y porque siempre nos quedará nuestro rinconcito a 5 ºC… A Mar y la Gwen porque son tan grandes como nuestro despacho, a Carmela por los ratos de confesiones y risas, a Bego, Ire, Aran, Sofi, Alba, Paula, Mariam y a todos los compañeros del CITA por haber hecho que mi paso por el centro sea uno de mis mejores recuerdos… espero que nunca terminen las cerveCITAs. A todos las personas que conocí durante mi estancia en Murcia, en especial a Marta Hernández, por hacerme ver la luz tras el túnel de la citometría y al Dr Jordi Roca por toda su paciencia y dedicación. A las granjas Los Golliznos y El Toscal y al Centro de inseminación CIAR-Grupo ArcoIris por facilitarnos los eyaculados necesarios para los experimentos. A Chori y compañía, los verdaderos protagonistas. A Mon y Ros, a los Dalmatillas de veterinaria, porque sé que siempre estarán ahí, en especial a Dave y Pati, my personal reviewers… Y, por supuesto, a mi familia, en especial a mis padres, a mi hermana y a Molli, por la insistencia, por creer en mi más que nadie (más que yo), por darme el apoyo necesario para no abandonar y conseguir mi objetivo. A Lourdes, Abelardo y resto de Almendraditos, porque un plato estrella y un flan siempre te ayudan a remontar. A Ángel (¿lo sabes o

qué?), a Kachap por estar “literalmente” pegado a mi mientras esta tesis tomaba forma y a Garban, porque al final ha sido él quién que me ha obligado a dar el último empujón. Gracias a todos los que habéis ayudado a que esta tesis haya sido posible.

TABLE OF CONTENTS ABSTRACT

1

RESUMEN

3 5

RESUM

CHAPTER 1 GENERAL INTRODUCTION

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1. Use of frozen-thawed sperm in pig production

9

1.1. Stress conditions during the cryopreservation process: cold shock and

10

osmotic stress 1.1.1. Cold shock

10

1.1.2. Osmotic stress

11

1.2. New strategies to improve frozen-thawed boar sperm quality

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2. Cholesterol as strategy for improving the quality of frozen-thawed sperm

13

2.1. Effect of cholesterol

13

2.2. Pre-frezing treatment of sperm with cholesterol-loaded cyclodextrins (CLC)

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2.3. Treatment of boar sperm with CLC

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3. Cryoprotectant requirements for CLC-treated boar sperm

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